Lnc-RT Heroᵀᴹ I (Cu gDNază) (Super Premix pentru sinteza ADNc de primă catenă din lncARN)
Specificații
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Cu gDNase) este un sistem de transcripție inversă dezvoltat special pentru lncRNA pentru a elimina rapid contaminarea ADN-ului genomic.5×gDNase Mix poate elimina rapid genomul rămas din ARN la 42°C timp de 2 minute, evitând efectiv interferența genomului asupra rezultatelor qPCR.
Mixul 5×L-RT HeroTM conține Foregene LncRNA Reverse Transcriptase dezvoltat special de Foregene, care este un nou tip de revers transcriptază special pentru lncRNA și alte șabloane complexe de ARN lung, cu afinitate ARN mai puternică și eficiență mai mare de înregistrare inversă.Sistemul optimizat face ca rata de transcriere inversă să fie mai rapidă și poate transcrie cu ușurință șabloane de ARN cu conținut ridicat de GC și structură secundară complexă.Sinteza de ADNc a primei catene poate fi finalizată la 42°C în 15 minute.
Componentele trusei
| 5× Amestecul gDNase |
| 5× Mix L-RT HeroTM |
| DdH2O fără RNază |
| Instrucțiuni |
Caracteristici și avantaje
■Capacitate eficientă de a elimina gDNA, care poate elimina gDNA din șablon în decurs de 2 minute.
■ Poate inversa eficient transcrierea lncARN.Când produsul de transcripție inversă este supus la qPCR, valoarea Ct este mai mică decât cea a sistemului convențional de transcripție inversă.
■ Sistem eficient de transcripție inversă, durează doar 15 minute pentru a finaliza sinteza primei catene de ADNc.
■ Șabloane complexe: șabloanele cu conținut ridicat de GC și structură secundară complexă pot fi, de asemenea, inversate cu eficiență ridicată.
■ Sistem de transcripție inversă de înaltă sensibilitate, șabloanele la nivel pg pot obține, de asemenea, ADNc de înaltă calitate.
■ Sistemul de transcriere inversă are stabilitate termică ridicată, temperatura optimă de reacție este 42℃, și are încă performanțe bune de transcriere inversă la 50℃.
Aplicare kit
Analiza cantitativă relativă lncRNA.
Analiza cantitativă absolută lncRNA.
Poate analiza rapid și cu precizie urme de ARN, cum ar fi virusul ARN.
Transcrierea inversă a șabloanelor de ARN cu conținut ridicat de GC sau structură secundară complexă.
Fluxul de lucru
Depozitare și termen de valabilitate
Setul trebuie depozitat la -20°C. Păstrați produsul într-un frigider cu temperatură constantă la -20°C imediat după primire.Dacă condițiile de depozitare sunt adecvate, produsul nu va degrada nicio performanță în perioada de valabilitate de 1 an.
Ghid de analiză a problemelor
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplificare specifică
1. Design de grund nerezonabil
Recomandare: Proiectați grunduri conform principiilor de proiectare a grundurilor.
2. Reziduuri de genom.
Sugestie: Asigurați-vă că prima etapă a temperaturii de reacție de îndepărtare a ADNg-ului este de 42°C, iar timpul de reacție poate fi, de asemenea, extins la 5 minute.
Nu există semnal de amplificare prin RT-qPCR
1. ARN-ul este degradat.
Recomandare: Materialul pentru extracția ARN-ului trebuie să fie cât mai proaspăt posibil și trebuie utilizat ARN de înaltă calitate și puritate ridicată.
2. ARN-ul conţine inhibitori.
Recomandare: Inhibitorii transcripției inverse includ în general SDS, săruri de guanidină, EDTA etc. Se recomandă spălarea precipitatului de ARN cu etanol 70% pentru a elimina inhibitorii.
3. Probleme de proiectare a amorsei.
Recomandare: Conform principiului de proiectare a amorsei, reproiectați amorsele pentru inspecție.
Banda țintă apare în controlul gol
1. Contaminarea instrumentelor de operare sau a reactivilor.
Recomandare: Toți reactivii sau echipamentele pentru experiment trebuie autoclavate.Fiți atenți și blând atunci când manipulați pentru a preveni aspirarea probelor de ADN în pipetă sau vărsarea din tubul centrifugei.
2. Contaminarea a avut loc în timpul pregătirii sistemului de reacție PCR.
Recomandare: Luați măsurile de precauție necesare la manipulare, cum ar fi: purtarea mănușilor din latex, utilizarea vârfurilor de filtrare.Utilizați amestecul PCR în timp real într-un sistem rezistent la contaminare.
3. Amorsele sunt degradate.
Sugestie: Utilizați electroforeza SDS-PAGE pentru a detecta dacă primerii sunt degradați și înlocuiți cu primeri noi pentru experimentele de detectare a fluorescenței.
Manual de instructiuni:
