Încă mai folosești Trizol pentru a extrage ARN?
Doamne, nu mă lăsa să-mi fac griji pentru sănătatea ta!
Trizol este pe cale să fie marginalizat, nu-mi spune că ești încă în întuneric?

Componenta principală a reactivului Trizol este fenolul, iar în operația experimentală se adaugă și reactivi organici precum cloroformul.Expunerea pe termen lung va afecta sănătatea dumneavoastră, în special contactul direct cu pielea poate provoca arsuri chimice severe și cicatrici permanente.

În circumstanțe normale, partenerii de laborator pot reduce pericolele doar înarmandu-se complet (purtarea halatelor de laborator, mănușilor și măștilor).

Și sfatul meu pentru tine este: vă rugăm să înlocuiți Trizolul direct pentru a evita vătămarea de la sursă.

1. Produsul de prima generație al extracției ARN
A apărut în 1987 (reactivi Trizol)

avantaj:
Extracție mai completă

Dezavantaje:
Sunt necesari reactivi toxici, cum ar fi izotiocianat de guanidin-fenol-cloroform;
Operare greoaie;
Trebuie să utilizați DNase pentru a elimina contaminarea cu ADN

2. Produsul de a doua generație al extracției ARN
A apărut în 1994 (QIAGEN RNeasy și majoritatea produselor autohtone)

avantaj:
Se adoptă metoda centrifugă pe coloană, care este ușor de operat;

Dezavantaj:
Trebuie centrifugată pentru a îndepărta resturile de țesut
Trebuie să utilizați DNase pentru a elimina contaminarea cu ADN

3.Produsul de a treia generație al extracției ARN
Apare în 2005 (QIAGEN RNeasy Plus și Foregenproduse din seria de purificare a ARN)

avantaj:
Utilizați direct coloana de îndepărtare a ADN-ului pentru a îndepărta ADN-ul și resturile de țesut în același timp, economisind timp și efort;
Sigur și convenabil, nu este nevoie să adăugați coloană de filtru și DNază pentru a îndepărta cu ușurință impuritățile și pentru a evita contaminarea ADN-ului

Să ne uităm la diferențele operaționale dintre produsul de prima generație (Trizol), produsul de a doua generație (RNeasy) și produsul de a treia generație (Foregene) de extracție a ARN:

Funcționarea din figură este clară: produsul din a treia generație are avantaje evidente

Doar trei cuvinte de descris: ușor!Rapid!Siguranță

Diagrama PK a rezultatelor experimentalepentruprodusele de extracție a ARN de prima generație, a doua și a treia generație:

1. Eelectroforetograma

Prima generație (1: Trizol)
A doua generație (2:QIAGEN Rneasy)
A treia generație (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Ce fel de produs este bun, veți ști prin comparație
ARN extras folosind kitul Foregene
Nu numai concentrație mare, ci și integritate bună

2. Graficul qPCR (graficul curbei de amplificare)

Prima generație (Trizol)

A doua generație (albastru cermijloaceQIAGEN RNeasy-, roșumijloaceQIAGEN RNeasy +)

A treia generație (albastru înseamnă Foregene, verde înseamnă QIAGEN RNeasy plus)

(Notă: Graficul QIAGEN RNeasy de qPCR de a doua generație înseamnă că kitul nu adaugă DNază și nu elimină contaminarea ADN-ului. Prin urmare, CT este mai mare și rezultatul nu este precis; QIAGEN RNeasy + înseamnă că DNază a fost adăugată și contaminarea ADN-ului a fost eliminată, iar rezultatul este precis)

Fie că este vorba despre o electroforetogramă sau un grafic cantitativ al curbei de amplificare PCR, calitatea produselor Foregene nu este inferioară produselor importate străine.