• Facebook
  • linkedin
  • youtube

1: Înlocuiți consumabilele experimentale la timp

știri812 (1) 

Configurați controlul negativ (NTC) și repetați-l de mai multe ori.Odată ce se constată că există contaminare cu produsul PCR în laborator, înlocuiți toate consumabilele experimentale la timp.Cum ar fi: rediluați și pregătiți primerii, resterilizați vârful pipetei, tubul EP, ddH2O etc., înlocuiți cu o pipetă nouă și împrumutați temporar alte laboratoare pentru a efectua experimente PCR.Laboratorul contaminat va fi ventilat și iradiat cu raze ultraviolete până când contaminarea cu produsul PCR este eliminată înainte de a continua cu experimentul.

2: Extindeți timpul de expunere la UV

știri812 (2)

Este de remarcat faptul că, pentru a elimina contaminarea cu ADN, radiația ultravioletă obișnuită ar trebui extinsă cu 2 ore decât de obicei.Chiar și așa, efectul iradierii UV asupra eliminării fragmentelor mici (sub 200 bp) de contaminare cu ADN nu este încă bun.

Lungimea de undă ultravioletă (nm) este în general de 254/300 nm și este suficientă pentru a iradia timp de 30 de minute.Trebuie remarcat faptul că atunci când alegeți UV pentru a elimina contaminarea produselor PCR reziduale, trebuie luate în considerare lungimea produsului PCR și distribuția bazelor în secvența produsului.Iradierea UV este eficientă numai pentru fragmentele lungi de peste 500 bp și are un efect redus asupra fragmentelor scurte.

În timpul iradierii UV, bazele pirimidinice din produsul PCR vor forma dimeri.Acești dimeri pot termina extensia, dar nu toate pirimidinele din lanțul ADN pot forma dimeri, iar iradierea UV poate, de asemenea, sparge dimerii..Gradul de formare a dimerului depinde de lungimea de undă UV, de tipul de dimer de pirimidină și de secvența de nucleotide adiacente situsului dimerului.Prin urmare, dacă fragmentele amplificate PCR sunt mici, se recomandă utilizarea sistemului UNG de contaminare a produsului anti-PCR.

3: Eliminatori de poluare cu ADN folosiți în mod obișnuit

știri812 (3)

Aerosolii sunt generați cu ușurință atunci când se adaugă pipete, ceea ce este greu de evitat și se va depune rapid.Prin urmare, este, fără îndoială, o alegere bună să folosiți în mod frecvent dispozitive speciale de eliminare a poluării ADN pentru a preveni răspândirea poluării ADN.

4: Utilizați sistemul anti-poluare UNG

știri812 (4)

După ce contaminarea produsului PCR este îndepărtată, laboratorul de testare poate utiliza sistemul de contaminare a produsului anti-PCR UNG pentru a preveni contaminarea produsului PCR.În laboratoarele generale, puteți efectua partiții experimentale simple, puteți separa strict zona de produse PCR de alte zone, puteți stabili anumite reguli și reglementări de laborator și puteți efectua instruiri relevante pentru a preveni apariția contaminării produsului PCR.

Recomandări: Înființarea unui laborator PCR rezonabil, menținerea unui mediu PCR bun, formularea procedurilor standard de operare PCR și cultivarea conștientizării operaționale riguroase a experimentatorilor sunt cheile pentru prevenirea sau reducerea poluării experimentelor PCR.


Ora postării: 12-aug-2021