• Facebook
  • linkedin
  • youtube

Testarea de laborator începe cu colectarea probei, iar colectarea probei este cel mai ușor de trecut cu vederea.Cel mai important lucru pentru colectarea probelor este selectarea tipului corect de eșantion, utilizarea instrumentelor de prelevare adecvate și efectuarea transportului și procesării rezonabile.

I.Tipul eșantionului

Tipurile comune de mostre sunt după cum urmează:

dsafgsd

Metoda de eșantionare se poate referi la specificațiile tehnice pentru monitorizarea de mediu a noului coronavirus pe piața comerțului agricol (bazar)”:

1. Tampoane din tampoane pentru gât, mâini, haine și alte obiecte ale practicienilor: este necesar să se folosească soluția de conservare a virusului în tubul de prelevare a virusului și să se infiltreze complet tampoanele de bumbac de prelevare.Suprafața pământului) se aplică în mod repetat și se clătește de mai mult de 3 ori.În același timp, este necesar să se efectueze eșantionare distribuită în mai multe puncte pe suprafața obiectului eșantionat.

2. Probe de tampon de suprafață alimentară: Probele de alimente nu pot fi colectate direct.Alimentele care urmează să fie colectate trebuie separate cu grijă și depozitate într-o pungă curată de prelevare înainte de colectarea probelor cu tampon.Este necesar să folosiți soluția de conservare a virusului în tubul de prelevare a virusului, după înmuierea completă a tamponului de bumbac de prelevare, pentru a unge și a clăti în mod repetat suprafața probei de hrană care urmează să fie colectată de mai mult de 3 ori.În același timp, este necesar să se efectueze eșantionare distribuită în mai multe puncte pe suprafața probei.

3. Probe de canalizare: În funcție de distribuția sistemului de drenaj pe piață, selectați 2-3 locații de prelevare a apelor uzate, cu accent pe colectarea rețelei de conducte interioare, în aval de direcția de curgere a apei sau racordarea la rețeaua de conducte municipale.Pentru a colecta o probă de tampon, scufundați-o în canalizare cu un tampon de bumbac de prelevare pentru a-l face să adsorbe apa reziduală și clătiți-l în tubul de prelevare de mai mult de 3 ori.Pentru a colecta probe de ape uzate, utilizați sticle de plastic din polietilenă pentru a colecta probe de apă uzată de 30-500 ml;pentru colectarea apelor uzate cu un volum mai mare de 500 ml, se pot folosi găleți din plastic din polietilenă sau echipamente speciale de îmbogățire a probei de apă la fața locului.În același timp, este necesar să se efectueze eșantionare distribuită în mai multe puncte pentru locația de prelevare a apelor uzate.

4. Probe de animale: Pentru animalele vii, tampoanele de prelevare pot fi folosite pentru a colecta tampoane de suprafață corporală, tampoane orofaringiene și tampoane anale, iar probele de excremente sau de secreție pot fi, de asemenea, colectate și înregistrate corespunzător pe foaia de înregistrare.Pentru mostrele de animale care au fost supuse jupuirii etc., utilizați tampoane de bumbac pentru a colecta probe de suprafață corporală și din cavitatea corpului.Este necesar să folosiți soluția de conservare a virusului în tubul de prelevare a virusului pentru a infiltra complet tamponul de bumbac de prelevare și apoi repetați aplicarea suprafeței probei alimentare care urmează să fie colectată.Shabu de mai mult de 3 ori.În același timp, este necesar să se efectueze eșantionare distribuită în mai multe puncte pe suprafața probei.

5. Alte aparate: containere pentru transportul și creșterea animalelor precum cuști sau bazine de pești.În primul rând, observați sau înțelegeți tipurile specifice de animale depozitate și crescute în recipient și colectați mostre de tampon pe peretele interior al recipientului sau mostre lichide ale conținutului.

6.Colectați mostre de aerosoli în zonele în care oamenii se adună, zone comerciale locale slab ventilate, birouri și camere de odihnă.

II.Unelte de prelevare de probe
1. Tub de colectare a sângelui
Dacă mai târziu trebuie să faceți teste de acid nucleic și probe de anticoagulant, este recomandat să utilizați un vas de sânge cu vid care conține anticoagulant EDTA pentru a colecta sânge;pentru probele de ser se recomanda folosirea unui vas de sange vacuum fara anticoagulant.

fdsgfd

2. Tampon de prelevare

Se recomanda folosirea tampoanelor din polipropilena in locul tampoanelor cu alginat de calciu sau cu stalpi de lemn, deoarece acestea pot contine substante care inactiveaza anumiti virusi si inhiba testarea PCR.Tampoanele cu capete de bumbac nu pot fi folosite, deoarece fibrele de bumbac au o puternică adsorbție de proteine ​​și nu sunt ușor eluate în soluția de conservare ulterioară.

În „Specificațiile tehnice pentru colectarea mixtă 10-în-1 și detectarea noilor acizi nucleici de coronavirus”, se stipulează clar că „tamponul de prelevare trebuie să fie fabricat din poliester, nailon și alte materiale fără bumbac și alginat de calciu, iar mânerul trebuie să fie din material care nu este lemnos.Punctul de rupere este la aproximativ 3 cm de partea superioară a capului tamponului, care este ușor de spart.”

CDC din Statele Unite a menționat, de asemenea, „Folosiți numai tampoane din fibră sintetică cu arbori din plastic sau sârmă.Nu utilizați tampoane cu alginat de calciu sau tampoane cu tije din lemn,deoarece pot conține substanțe care inactivează unii viruși și inhibă testarea PCR.

În prezent, utilizat pe scară largă este un tampon de nailon steril de unică folosință combinat cu o tijă de plastic.Tamponul flocat are o absorbție mai bună a apei și o rată de eliberare mai bună.În funcție de diferitele locuri de prelevare, capul de tampon are, de asemenea, dimensiuni și fibre diferite.Grosimea.”

fsdg

3. Probă de soluție de conservare a transportului

Soluție de conservare a inactivarii virusului: o cantitate adecvată de concentrație de sare de guanidină și o varietate de componente de liză virală pot liza direct virusul pentru a elibera acid nucleic, inactiva RNază și ADNază și asigură integritatea acidului nucleic, care poate fi utilizat pentru detectarea qPCR ulterioară.Nu poate fi folosit pentru cultivarea și izolarea virusului.

Soluție de transport și conservare a virusului: conține săruri, aminoacizi, vitamine, glucoză și proteine ​​necesare supraviețuirii virusului, care pot menține activitatea virusului.Poate fi folosit pentru extracția acidului nucleic și detectarea virusului în viitor și poate fi folosit și pentru cultivarea și separarea virusului.

4. Tub de conservare a probei și pungă de probă

Tubul de depozitare a probei trebuie să fie un tub steril din plastic cu un capac cu filet care nu absoarbe acidul nucleic.Fiecare tub de probă trebuie acoperit cu o pungă de probă pentru a preveni scurgerea și contaminarea probei.

fdsdf

III.Substanțe interferente din probă

Substanțe interferente în experimentele PCR

1. interferent endogen

Substanțele prezente în proba de corp pot interfera cu detectarea altor substanțe.

Sânge:hem (>1mg/ml), hemin (>0,1ng/μl), trigliceride, IgG etc.;

Urină:uree (20 mM);

Scaun:polizaharide vegetale, colat;

țesut:protează, colagen;

Lapte: protează, ion de calciu;

Droguri: antibiotice, medicamente antivirale, hormoni etc.

alte.

2. interferent exogen

Provine din substanțe care pot interfera cu detectarea altor substanțe in vitro.Aditivi pentru probe și substanțe care pot fi contactate în timpul colectării și prelucrării probelor:

Rechizite de testare: gel de separare a serului, recipient de colectare a probei și dop de cauciuc, cateter, lichid de spălare a cateterului, pudră de mănuși etc.

Anticoagulant: heparină (>0,1 U/ml), EDTA (>0,5 mM), etc.;

Solventi organici: izopropanol (>0,1 UI/ml), betaină, dimetil sulfoxid, formamidă, glicerină, PEG etc.;

Dezinfectanți: alcooli (etanol>1%), aldehide, fenoli (fenol>0,2%), peroxizi, acizi tari (HCL), alcalii tari (NaOH), etc.;

Detergent:SDS (>0,005%);

Sol: Humus

Colorant: Indigo

alte.

În condiții reale de eșantionare în aer liber, cum ar fi colectarea de probe de mediu, eșantioanele pot conține o varietate de substanțe interferente, iar compoziția substanțelor interferente în fiecare locație este diferită, ceea ce necesită ca experimentele de interferență PCR să fie efectuate în funcție de condițiile locale.

IV.Condiții de depozitare și transport a probelor

Probele clinice proaspăt colectate trebuie trimise la laborator în decurs de 2 până la 4 ore după recoltare la 2°C până la 8°C.A se păstra la 4℃ în 24 de ore.Specimenele utilizate pentru izolarea virusului și detectarea acidului nucleic trebuie testate cât mai curând posibil.Probele care pot fi testate în 24 de ore pot fi păstrate la 4°C;Probele care nu pot fi detectate în 24 de ore trebuie păstrate la -70°C sau mai puțin (dacă nu - A se păstra la 70°C la frigider la -20°C).

Rezumat:Colectarea, transportul și depozitarea standardizate a probelor sunt esențiale pentru testarea ulterioară.Negative false ale multor teste de laborator sunt cauzate de colectarea, transportul și depozitarea necorespunzătoare a probelor care duc la degradarea acidului nucleic viral.Cu toate acestea, multe laboratoare încă ignoră importanța eșantionării.Sper că acest articol poate trezi atenția tuturor asupra eșantionării și poate face eșantionare mai științifică și rezonabilă!

Produs inrudit:

Kit de detectare a acidului nucleic varianta SARS-CoV-2 (I) (metoda sondei fluorescente PCR multiple) - pentru detectarea mutanților din Brazilia, Africa de Sud și Marea Britanie


Ora postării: 17-sept-2021