• Facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Kit de izolare a ARN total pentru plante Plus Kit de purificare a ARN total pentru plante bogate în polizaharide și polifenoli

Descriere kit:

 

Cat.Nr.RE-05021/05022/05024

 

Pentru purificarea ARN-ului total din probe generale de plante care conțin componente bogate în polizaharide și polifenoli.

Extrageți rapid ARN total de înaltă calitate din probe de plante cu conținut ridicat de polizaharide și polifenoli.

Fără RNază folosind coloana de curățare ADN

Simplu - toate operațiunile sunt finalizate la temperatura camerei

Rapid - operațiunea poate fi finalizată în 30 de minute

Sigur – nu se utilizează reactiv organic puterea genelor anterioare


Detaliile produsului

Etichete de produs

FAQ

DESCARCĂ RESURSE

Specificații

50 de pregătiri, 200 de pregătiri

Setul folosește coloana de spin și formula dezvoltate de Foregene, care poate extrage eficient ARN total de înaltă puritate și de înaltă calitate din diferite țesuturi vegetale cu conținut ridicat de polizaharide sau polifenoli.Oferă coloana de curățare ADN care poate îndepărta cu ușurință ADN-ul genomic din supernatant și lizat de țesut.Coloana numai cu ARN poate lega eficient ARN.Kitul poate procesa un număr mare de mostre în același timp.

Întregul sistem nu conține RNază, astfel încât ARN-ul purificat nu va fi degradat.Tamponul PRW1 și Tamponul PRW2 pot asigura că ARN-ul obținut nu este contaminat cu proteine, ADN, ioni și compuși organici.

Componentele trusei

tampon PSL1, tampon PS, tampon PSL2

Tampon PRW1, tampon PRW2

DdH fără RNază2O, Coloana de curățare ADN

Coloana numai ARN

Caracteristici și avantaje

■ Funcționare la temperatura camerei (15-25℃) pe tot parcursul procesului, fără baie de gheață și centrifugare la temperatură joasă.
■ Kit complet RNase-Free, nu trebuie să vă faceți griji cu privire la degradarea ARN-ului.
■ Adecvat în special pentru purificarea ARN-ului din probe de plante de polizaharide și polifenoli.
■ Coloana de curățare ADN se leagă în mod specific de ADN, astfel încât trusa să poată elimina contaminarea ADN-ului genomic fără a adăuga DNază.
■ Randament ridicat de ARN: coloana numai cu ARN și formula unică pot purifica eficient ARN-ul.
■ Viteză mare: ușor de utilizat și poate fi finalizat în 30 de minute.
■ Siguranţă: nu este necesar reactiv organic.
■ Calitate înaltă: Fragmentele de ARN purificate sunt de înaltă puritate, lipsite de proteine ​​și alte impurități și pot îndeplini diverse aplicații experimentale în aval.

Parametrii produsului

■ Aplicații în aval: sinteza cADN-ului prima catenară, RT-PCR, clonarea moleculară, Northern Blot etc.
■ Probă: țesuturi vegetale proaspete sau congelate de polizaharide și polifenoli
■ Dozaj: 50mg tesut vegetal
■ Capacitatea maximă de legare a ARN a coloanei de purificare: 80 μg
■ Volumul de eluare: 50-200 μl

Aplicare kit

Este potrivit pentru extracția și purificarea ARN-ului total din probe de țesut de plante proaspete sau congelate (în special țesut de frunze de plante proaspete) cu conținut ridicat de polizaharide și polifenoli.

Fluxul de lucru

planta total ARN-flux de lucru simplu

Diagramă

Kit de izolare a ARN total al plantelor Plus 6

Plant Total ARN Isolation Kit Plus a procesat 50 mg de frunze proaspete de polizaharide și polifenoli, iar ARN purificat 5% a fost testat prin electroforeză.
1: Banana
2: Ginkgo
3: Bumbac
4: rodie

Depozitare și termen de valabilitate

Acest kit poate fi păstrat timp de 24 de luni în condiții uscate la temperatura camerei (15-25℃);dacă trebuie păstrat mai mult timp, poate fi păstrat la 2-8℃.
Tamponul PSL1 poate fi plasat la 4℃ timp de 1 lună după adăugarea de β-mercaptoetanol (se recomandă adăugarea acestuia în același timp al experimentului).


  • Anterior:
  • Următorul:

  • Coloana blocată

    După blocarea coloanei, randamentul de ARN este redus sau chiar imposibil de purificat, iar masa de ARN obţinută este scăzută.

    Analiza cauzelor comune:

    1. Pauzele de probă nu sunt amănunțite.

    Ruperea probei nu provoacă blocarea completă a COLONAȚEI DE CURĂȚARE A ADN-ului, afectând în același timp randamentul și calitatea ARN.Vă recomandăm operația de măcinare rapidă într-un azot lichid suficient atunci când ați spart probele. Încercați să zdrobiți peretele celular al probei, membrana celulară și alte țesuturi.Pentru mostrele de plante de polizaharide de poliol, vă recomandăm să utilizați KIT DE IZOLARE ARN Total Plant PLUS.

    2. Când se aspira supernatantul de probă separată cu coloana de curățare ADN, posibilul precipitat fragmentat de celule poate fi inhalat.

    Sedimentele fragmentate celulare prelevate vor cauza Coloana ARN-ONLY care va fi blocată atunci când se efectuează operația de adsorbție a ARN (vezi pasul 6).Vă recomandăm să vă aspirați cu atenție acest supernatant pentru a evita aspirarea resturilor celulare.

    3. Cantitatea inițială a probei este prea mare.

    Utilizarea excesivă a probei va avea ca rezultat fragmentarea incompletă a probei sau liza celulară incompletă de către Buffer PSL1, ducând la blocarea coloanei de purificare în timpul purificării.Kit de izolare a ARN total al plantelor Fiecare probă de operare purificată este de 50 mg.Pentru mostrele de plante de polio-polizaharide, vă recomandăm să încercați KIT DE IZOLARE ARN Total Plant PLUS.

    4. Temperatura centrifugei este prea scăzută.

    Întregul proces de izolare și purificare a ARN-ului se realizează la temperatura camerei (20-25°C), cu excepția faptului că țesutul eșantionului este spart de azot lichid. Temperatura unor centrifuge criogenice este mai mică de 20°C., care poate provoca blocarea coloanei de curățare ADN și/sau a coloanei numai ARN.Dacă se întâmplă acest lucru, setați temperatura centrifugei la 20-25, șiasigurați-vă că amestecul de liză și/sau supernatantul adăugat cu etanol a fost preîncălzit la 37°C°C.

    Niciun ARN extras sau randamentul de ARN este scăzut

    De obicei, există mulți factori care afectează eficiența recuperării, cum ar fi: conținutul de ARN al probei, metoda de operare, volumul de eluție etc.

    Analiza cauzelor comune, după cum urmează:

    1. În timpul operațiunii a fost efectuată o baie de gheață sau o centrifugare la temperatură joasă (4°C).

    Sugestie: Operați la temperatura camerei (15-25°C) în întregul proces, nu faceți baie de gheață și centrifugare la temperatură joasă.

    2.ARN-ul a fost degradat din cauza conservării necorespunzătoare a probei sau a conservării pe termen lung a probei.

    Recomandare: Probele proaspăt colectate trebuie congelate rapid în azot lichid și apoi depozitate la -80 ° C pentru o perioadă lungă de timp, evitați înghețarea și dezghețarea repetată a probelor;sau imediat înmuiați probele în soluție de stabilizator de ARN RNAlater (probe de animale).

    3. Fragmentarea insuficientă a probei și liza duc la blocarea coloanei de purificare.

    Sugestie: Când măcinați țesutul, vă rugăm să vă asigurați că țesutul este suficient de măcinat și transferați-l rapid în tamponul pre-preparat PSL1 (confirmați că a fost adăugată proporția corectă de β-ME, vezi pasul 1 al procedurii).

    4. Eluentul a fost adăugat incorect.

    Sugestie: Asigurați-vă că ddH2O fără RNază este picurat în mijlocul membranei coloanei de purificare.

    5. Volumul corect de etanol absolut nu a fost adăugat la tamponul PSL2 sau tamponul PRW2.

    Sugestie: Urmați instrucțiunile, adăugați volumul corect de etanol absolut în Buffer PSL2 și Buffer PRW2 și amestecați bine înainte de a utiliza kitul.

    6. Cantitatea de probă de țesut este inadecvată.

    Sugestie: Utilizați 50 mg de țesut la 500 μl de tampon PSL1.Utilizarea prea multă țesut va reduce cantitatea de ARN extras și puritatea ARN-ului rezultat va fi, de asemenea, redusă.Vă recomandăm insistent ca doza inițială a probei să nu depășească 50 mg per operațiune de extracție a ARN.

    7. Volum de eluție inadecvat sau eluție incompletă.

    Sugestie: Volumul de eluent al coloanei de purificare este de 50-200 μl;dacă efectul de eluție nu este satisfăcător, se recomandă prelungirea timpului la temperatura camerei după adăugarea ddH2O fără RNază preîncălzită, cum ar fi 5-10 min.

    8. Coloana de purificare are reziduuri de etanol după spălarea cu BufferPRW2.

    Sugestie: Dacă tubul gol este centrifugat timp de 1 min și mai rămâne etanol după spălare în tampon PRW2, puteți crește timpul de centrifugare a tubului gol la 2 minute sau puneți coloana de purificare la temperatura camerei timp de 5 minute pentru a elimina complet etanolul rezidual.

    9.Setul a fost folosit incorect.

    Sugestie: pentru mostrele de plante de polizaharide polifenolice, este posibil ca utilizarea truselor obișnuite, cum ar fi Plant Total ARN Isolation Kit, să nu poată obține mostre de ARN ideale.Vă recomandăm să utilizați Plant Total ARN IsolationKit Plus, care este special conceput pentru mostrele de plante de polizaharide polifenolice.Un kit special dezvoltat pentru extragerea ARN-ului din probe de plante de polifenoli și polizaharide.

    Valoarea OD260/OD280 este scăzută

    Eluarea ARN cu ddH2O și utilizat pentru citirile spectrofotometrului are ca rezultat valori scăzute OD260/OD280.Vă recomandăm să utilizați 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (în loc de ddH2O fără RNază pentru eluarea ARN) pentru a obține valori OD260/OD280 relativ corecte, consultați „Testele de concentrare și purificare a ARN” la pagina 19.

    ARN-ul purificat este degradat

    Calitatea ARN-ului purificat este legată de factori precum conservarea probei, contaminarea cu RNază și manipularea.

    Analiza cauzelor comune:

    1. Probele de țesut nu au fost depozitate la timp după colectare.

    Recomandare: Dacă probele de țesut nu sunt folosite la timp după colectare, vă rugăm să le păstrați imediat în azot lichid la temperatură scăzută sau să le transferați la -80°C pentru depozitare pe termen lung după congelare rapidă în azot lichid sau să scufundați imediat probele în soluție de stabilizator ARN RNAlater (probe de animale).Pentru extracția ARN, încercați să utilizați mostre de țesut proaspăt colectate.

    2. Congelarea și decongelarea repetată a probelor de țesut.

    Sugestie: Când depozitați probe de țesut, cel mai bine este să le tăiați în bucăți mici pentru conservare și să scoateți o parte din ele atunci când le utilizați pentru a evita degradarea ARN-ului cauzată de înghețarea și dezghețarea repetată a probelor.

    3.RNaza se introduce în sala de operație sau nu se poartă mănuși de unică folosință, măști etc.

    Sugestie: Experimentele de extracție a ARN sunt cel mai bine efectuate în operațiuni separate de ARN, iar masa de laborator trebuie curățată înainte de experiment, iar mănuși și măști de unică folosință trebuie purtate în timpul experimentului pentru a evita degradarea ARN cauzată de introducerea RNazei în cea mai mare măsură.

    4.Reactivul este contaminat cu RNază în timpul utilizării.

    Sugestie: Înlocuiți cu o nouă serie de truse de extracție a ARN total din plante pentru experimente conexe.

    5. Tuburile de centrifugă și vârfurile pipetei utilizate pentru manipularea ARN-ului sunt contaminate cu RNază.

    Sugestie: Asigurați-vă că tuburile de centrifugă, vârfurile pipetei, pipetele etc. utilizate în extracția ARN sunt toate fără RNază.

    Manuale de instructiuni:

    Plant Total ARN Isolation Kit Plus Manual de instrucțiuni

     

    Scrie mesajul tău aici și trimite-l nouă