Nașterea PCR
PCR (reacție în lanț a polimerazei)
Au trecut mai bine de 30 de ani de la inventarea reacției în lanț a polimerazei.Timp de mai bine de 30 de ani, după ce numeroși savanți din întreaga lume continuă să suplimenteze și să se îmbunătățească, tehnologia PCR a devenit cea mai utilizată și mai des folosită și cea mai importantă metodă de cercetare de bază în întregul domeniu al științelor vieții.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR etc. dezvoltate pe baza aplicării largi a tehnologiei PCR tradiționale, precum și nou-a apărut Digital PCR (digital PCR), au îmbogățit foarte mult metodele de cercetare ale majorității cercetătorilor științifici și au accelerat foarte mult procesul de dezvoltare a științelor vieții moderne, în special biologia moleculară, a adus o mare contribuție la studiul vieții și naturii omenirii.
Defecte ale tehnologiei tradiționale PCR
Separarea acidului nucleic complex șiextracţie:
★ Tehnologie PCR tradițională: necesară
★ Tehnologie derivată PCR: necesară
★ Probele de ADN și ARN: diferențe mari, cerințe de funcționare dificile
★ Pericole pentru organism: reactivii toxici dăunează organismului
Tehnologia PCR tradițională și tehnologia derivată au o condiție prealabilă - separarea și purificarea acidului nucleic
Orice probă biologică trebuie să treacă printr-o serie de procesări complicate și plictisitoare pentru a obține probe de acid nucleic care îndeplinesc cerințele tehnologiei PCR.
Separarea și extragerea ADN-ului și a ARN-ului a fost întotdeauna o sarcină de bază pe care cercetătorii științifici relevanți trebuie să o repete în fiecare zi.
Datorită diferențelor uriașe dintre probe, procesele de separare și extracție ale ADN-ului și ARN-ului sunt, de asemenea, foarte diferite.Această muncă necesită un nivel ridicat de competență tehnică pentru operatori.Tehnicile tradiționale de separare și extracție necesită un contact pe termen lung cu unii reactivi chimici foarte toxici.Va provoca daune ireversibile corpului operatorului și chiar va provoca daune directe în timpul experimentului.
În același timp, pentru cei care au un număr mare de probe de studiat, separarea și extracția acizilor nucleici este o sarcină care necesită multă muncă.
Trusele de izolare și extracție a acidului nucleic de pe piață sunt acum mature și există multe mărci, dar sunt aproximativ aceleași.Indiferent dacă este vorba de un kit centrifugal pe coloană cu membrană de silicagel sau de un kit de metodă de perle magnetice, este nevoie de mult timp și este costisitor.Pe lângă costul trusei, există și cerințe speciale pentru echipamentele de laborator.Stația de lucru automatizată utilizată în metoda margelelor magnetice este un echipament foarte tipic la scară mare, de mare valoare, ceea ce reprezintă o cheltuială uriașă pentru laborator.
În concluzie
Înainte de a efectua experimente PCR, pretratarea probelor este o durere de cap inevitabil și întotdeauna pentru cercetători.Cum se rezolvă această problemă și dacă experimentele PCR pot fi efectuate fără separarea și extracția acizilor nucleici a fost întotdeauna gândirea majorității cercetătorilor științifici și a personalului de laborator clinic.
Soluția lui Foregene
După ani de cercetări minuțioase privind tehnologia Direct PCR și kiturile aferente, Forgene a depășit cu succes multe blocaje și a realizat cu succes PCR directă pentru multe tipuri de probe diferite, cu rezistență și adaptabilitate puternice, permițând cercetătorilor să scape de separarea și extracția greoaie și periculoasă a acizilor nucleici.Acest lucru va reduce foarte mult intensitatea muncii tuturor, va accelera procesul de experiment și va economisi costurile de cercetare științifică și de testare.
Înțelegerea și cunoștințele lui Forgene despre DirectPCR
În primul rând, tehnologia DirectPCR este o tehnologie PCR directă pentru diferite țesuturi de probă biologică.În această condiție tehnică, nu este nevoie să se separe și să extragă acizii nucleici, iar proba de țesut este utilizată direct ca obiect, iar primerii genei țintă sunt adăugați pentru reacția PCR.
În al doilea rând, tehnologia DirectPCR nu este doar o tehnologie tradițională de amplificare a șablonului ADN, ci include și PCR cu transcripție inversă șablon ARN.
În al treilea rând, tehnologia DirectPCR nu numai că realizează direct reacții PCR calitative de rutină pe probe de țesut, dar include și reacții qPCR în timp real, care necesită ca sistemul de reacție să aibă o capacitate puternică de a rezista interferențelor fluorescenței de fond și de a antagoniza stingerea fluorescenței endogene.
În al patrulea rând, probele de țesut vizate de tehnologia DirectPCR necesită doar eliberarea de șabloane de acid nucleic și nu îndepărtează proteinele, polizaharidele, ionii de sare etc. care interferează cu reacția PCR.Acest lucru necesită ca polimeraza acidului nucleic și amestecul PCR din sistemul de reacție să aibă anti-reversibilitate și adaptabilitate excelente și pot asigura activitatea enzimatică și acuratețea replicării în condiții complexe.
În al cincilea rând, probele de țesut vizate de tehnologia DirectPCR nu au fost supuse niciunui tratament de îmbogățire cu acid nucleic, iar cantitatea de șablon este foarte mică, ceea ce necesită o sensibilitate extrem de mare și eficiență de amplificare a sistemului de reacție.
Concluzie
Tehnologia DirectPCR este una dintre cele mai importante dezvoltări și inovații tehnologice din ultimii 30 de ani de la nașterea tehnologiei PCR.Forgene a fost și va continua să fie un pionier și inovator al acestei tehnologii.
Perspectiva de aplicare a tehnologiei DirectPCR este foarte largă.Îmbunătățirea și promovarea continuă a acestei tehnologii vor aduce cu siguranță schimbări subversive cercetării științifice și activității de inspecție.Aceasta este o revoluție a tehnologiei PCR.
Ora postării: 21-feb-2017
