Construirea SOP System

Stabiliți POS experiment PCR pentru a standardiza comportamentul personalului de experiment.

Experimentatorii respectă cu strictețe procedurile de operare și reduc la minimum poluarea PCR care poate fi cauzată de factori umani sau previn apariția poluării în operațiune.În plus, experimentatorul ar trebui să aibă cunoștințele și abilitățile profesionale corespunzătoare, inclusiv competența în operarea echipamentelor aferente, clarificarea întregului proces de lucru, stăpânirea metodelor de tratare a contaminării și a metodelor de control al calității în laborator și să fie capabil să interpreteze corect rezultatele testelor.

Building Standard PCR Laboratory

Laboratorul PCR este împărțit în principiu în patru zone, și anume zona de preparare a reactivilor, zona de prelucrare a probei, zona de amplificare și zona de analiză a produsului de amplificare.Primele două zone sunt zone de pre-amplificare, iar ultimele două zone sunt zone de post-amplificare.Zona de pre-amplificare și zona de post-amplificare ar trebui să fie strict separate.Materialele experimentale, reactivii, hârtia de înregistrare, pixurile, materialele de curățare etc. pot curge numai din zona de pre-amplificare în zona de post-amplificare, adică din zona de preparare a reactivului, zona de prelucrare a probei, zona de amplificare și zona de analiză a produsului de amplificare și nu trebuie să curgă în sens invers.Fluxul de aer din laborator ar trebui să curgă și din zona de pre-amplificare în zona de post-amplificare, nu în direcția inversă.

Reduceți etapele experimentale

Dacă laboratorul efectuează doar detectarea și identificarea prin PCR, se recomandă utilizarea PCR cantitativă fluorescentă în loc de PCR convențională.

Rezultatele de detecție PCR cantitativă prin fluorescență pot fi colectate și analizate prin semnale fluorescente, astfel încât nu este nevoie să deschideți capacul pentru electroforeză după reacție, ceea ce evită contaminarea produselor PCR cauzată de scurgerea produselor de reacție pentru a forma aerosoli.Dacă creșteți numărul de deschideri ale capacului în timpul etapei de încărcare a electroforezei pe gel, este probabil să apară contaminarea cu aerosoli.Se recomandă promovarea aplicării PCR cantitativă și înlocuirea treptat a PCR calitativă.

Adopta sistemul UNG anti-poluare

Sistemul UNG anti-PCR de contaminare a produsului este utilizat pentru reacția PCR.

Sistemul folosește dUTP în loc de dTTP.După reacția PCR, toate produsele PCR (fragmente de ADN) sunt încorporate cu dUTP;în următoarea rundă de reacție PCR, enzima UNG adăugată în sistem este incubată la 37°C timp de 5 minute înainte de PCR, care poate fi specifică Degradează toate fragmentele de ADN care conțin dUTP și apoi se realizează reacția PCR.Acest lucru poate elimina complet contaminarea cu aerosoli cauzată de produsele PCR.Efectul este prezentat în figura de mai jos:

Notă: Pentru seria PCR directă, puteți alege produsele din serie ale sistemului de poluare a produselor anti-PCR de la FJ Biotech

Sugera

Pentru laboratoarele care efectuează teste de genotipizare la scară largă, se recomandă cu tărie utilizarea sistemului UNG de contaminare a produselor anti-PCR pentru testarea reactanților, în plus față de construcția de laboratoare rezonabile.

Memento: Utilizarea acestui sistem nu poate elimina contaminarea produsului PCR care a fost deja cauzată.Prin urmare, sistemul UNG trebuie utilizat la începutul testului relevant, iar sistemul UNG trebuie utilizat întotdeauna pentru amplificarea PCR, astfel încât să se prevină contaminarea produselor PCR.Fals pozitiv.

Se recomandă utilizarea sistemului Direct PCR-UNG de la Forge Biotech atunci când se efectuează teste pe scară largă, cum ar fi: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Kit PCR direct pentru semințe de plante-UNG;

Kit PCR direct pentru țesuturi animale-UNG;

Kit PCR direct Mouse Tail-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Această serie de kituri de la Foregene nu numai că poate efectua detectarea PCR rapid și pe scară largă, dar poate preveni și controla eficient contaminarea produsului PCR.