Enzima Taq cu pornire la cald este utilizată pe scară largă.În comparație cu ADN polimeraza obișnuită, enzima Taq cu pornire la cald poate evita în mod eficient o anumită amplificare nespecifică și formarea de dimeri de primer și poate îmbunătăți în mod eficient rata de succes a amplificării genei țintă.În special în domeniul testării genetice, enzima Taq cu pornire la cald a fost identificată ca standard obligatoriu în industrie, iar ADN polimeraza obișnuită nu trebuie utilizată.După cum se poate observa din cele de mai sus, enzimele Taq cu pornire la cald sunt utilizate pe scară largă.În prezent, pe piața internă există multe mărci de enzime Taq cu pornire la cald, dar nu există multe enzime Taq cu pornire la cald de înaltă calitate.Confruntați cu atât de multe produse cu enzime Taq cu pornire la cald, cum ar trebui să alegem?

1. Selectați enzima Taq cu pornire la cald cu eficiență ridicată de amplificare

Eficiența amplificării PCR este strâns legată de performanța enzimei Taq.După ce este optimizat un sistem de reacție enzimatic Taq bun, eficiența de amplificare este peste 95%, iar intervalul de amplificare a cantității de șablon inițial este larg.Amplificarea satisfăcătoare poate fi obținută atunci când conținutul de genă țintă este scăzut și nu este ușor să fii otrăvit atunci când cantitatea de șablon este mare și perioada de amplificare exponențială este lungă.Pentru enzima Taq cu performanțe slabe, chiar dacă sistemul de reacție a fost optimizat de mai multe ori, eficiența de amplificare este încă mai mică de 90%, forma „S” a curbei de amplificare nu este evidentă, panta este mică, iar curba este plată.Când cantitatea de șablon este mică, nu poate fi amplificată, iar atunci când cantitatea de șablon este mare, efectul de amplificare nu este ideal.Prin urmare, selecția ADN polimerazelor cu eficiență ridicată de amplificare este crucială pentru succesul PCR și qPCR.

2. Selectați enzima Taq cu pornire la cald cu putere enzimatică puternică

Puterea enzimatică a enzimei Taq este legată de eficiența de amplificare.În general, cu cât este mai puternică puterea enzimatică a enzimei Taq cu pornire la cald, cu atât perioada de creștere exponențială a amplificării PCR este mai lungă, cu atât curba „în formă de S” mai tipică, cu atât valoarea semnalului de fluorescență este mai mare și cu atât este mai potrivită pentru detectarea PCR multiplex.ADN-polimerazele de marcă cu putere enzimatică slabă pot suporta, în general, doar reacții 2-plex.Când se efectuează reacții 3-plex, curba de amplificare este scăzută, valoarea semnalului de fluorescență este scăzută și nu există o curbă de amplificare tipică, astfel încât rezultatele sunt dificil de judecat.

3. Selectați o enzimă Taq cu pornire la cald cu sensibilitate ridicată

În general, ADN polimeraza are o eficiență ridicată de amplificare și o sensibilitate ridicată, dar există și inconsecvențe.Dacă abundența genei țintă a probei de amplificat este scăzută, se recomandă testarea sensibilității de amplificare a enzimei Taq.Cea mai obișnuită metodă de detectare este de a efectua diluția cu gradient de 10 sau 5 ori a fragmentului de plasmidă a genei țintă, de a efectua detectarea PCR la diluția mai mică și de a selecta enzima Taq cu pornire la cald cu sensibilitate de detecție mai mare.

Din cele de mai sus se poate observa că cercetătorii trebuie să aleagă în funcție de propriile cerințe experimentale și condiții de finanțare.Cel mai bine este să faceți un experiment de amplificare cu diluție în gradient pentru a detecta eficiența amplificării și sensibilitatea enzimei Taq cu pornire la cald.

Un exemplu de Foregene's Taq ADN polimeraza:

Foreasy HS Taq ADN polimerază

Descriere

Foreasy HS Taq DNA Polymerase este o ADN polimerază exprimată în bacterii de inginerie Escherichia coli prin tehnologia de recombinare a genelor.Enzima este combinată cu un tampon de reacție unic, ceea ce face ca produsul să fie foarte rezistent și compatibil și poate utiliza direct lizatul de probă (sistemul Foregene Lysis) ca șablon pentru reacțiile de detectare.

Aplicație

Detectarea PCR calitativă și PCR cantitativă a șabloanelor purificate și a șabloanelor nepurificate.

Control de calitate

1.Nu a fost detectată activitate nuclează exogenă

2.Metoda PCR pentru detectarea ADN-ului genomic rezidual fără gazdă

3. Poate amplifica eficient genele cu o singură copie în genomul uman

4. A se păstra la temperatura camerei timp de o săptămână, fără modificări evidente ale activității

Detalii produs: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/