Introducere:

Moleculele de ARN pot interacționa extensiv cu alte molecule biologice, cum ar fi proteinele, ADN-ul și ARN-ul, și astfel există în celule și organisme sub formă de complexe macromoleculare.Printre acestea, complexele ARN-proteină sunt existența și funcția ARN Una dintre formele importante ale.ARN pull-down este o metodă clasică pentru screening-ul și identificarea moleculelor de ARN, în special a proteinelor care interacționează ale moleculelor de lncRNA, și este recunoscută de majoritatea cercetătorilor și a revistelor academice cu autoritate internațională.Astăzi, FORREGENE vă va împărtăși principiul experimental și procesul tehnic al ARN pull-down, poate îl puteți folosi

1. Principiul experimental al tehnologiei ARN pull down:

Transcrierea și sinteza in vitro a fragmentelor de lncARN sau lncARN țintă marcate cu biotină (inclusiv fragmente de ARN utilizate ca martori pozitivi și negativi) și se incubează cu extracte celulare;utilizați margele magnetice ancorate cu avidină pentru a colecta complexe ARN-proteină sau ARN-ARN. După spălare minuțioasă, complexul este eluat.Dacă se detectează molecula țintă de proteină care interacționează cu ARNlc, se efectuează electroforeza proteică pe produsul ARN-pull down, se detectează proteina țintă prin colorare cu argint și se taie gelul pentru spectrometrie de masă;de asemenea, efectuează direct verificarea Western blot pe produsul pull-down;dacă este detectat Pentru moleculele țintă de ARN care interacționează cu lncARN, produsele ARN-pull down sunt supuse extracției ARN și se realizează detecția specifică qRT-PCR.

2. Procesul de experiment al tehnologiei ARN pull down:

3. Serviciul tehnic pentru ARN pull down al FOREGENE:

Cultură de celule

Prepararea extractului proteic total/nuclear/plasmatic celular

Experimentul ARN pull down

Electroforeza SDS-PAGE, colorant argintiu

Spectrometrie de masă și experimente WB

Raport experimental

4. Caz experimental

Următoarea figură arată rezultatele detecției ARN-ului FJ Bio-Bio și electroforezei SDS-PAGE, în care săgeata roșie marchează banda de diferență:

Grupul de cercetare al profesorului Song Xu de la Universitatea Sichuan a acumulat 15 ani de acumulare pe termen lung în domeniul cercetării lncRNA.Foregene Bio și grupul de cercetare al profesorului Song Xu au cooperat pentru a lansa tehnologia ARN pull down a lncRNA, care vă va oferi un rezultat satisfăcător pentru experimentul dumneavoastră.