respectă contractul”, se conformează cerințelor pieței, se alătură concurenței de pe piață prin calitatea sa bună, de asemenea, oferind un suport mai cuprinzător și mai superb pentru clienți pentru a-i lăsa să devină mare câștigător.Urmărirea companiei, este cu siguranță plăcerea clienților pentru China, cel mai bine vândut kit de extracție virală ADN&Rna, ne-am extins afacerea în Germania, Turcia, Canada, SUA, Indonezia, India, Nigeria, Brazilia și alte regiuni ale lumii.Lucrăm din greu pentru a fi unul dintre cei mai buni furnizori globali.
respectă contractul”, se conformează cerințelor pieței, se alătură concurenței de pe piață prin calitatea sa bună, de asemenea, oferind un suport mai cuprinzător și mai superb pentru clienți pentru a-i lăsa să devină mare câștigător.Urmărirea companiei, este cu siguranță plăcerea clienților pentruKit de extracție ADN și ADN din China și extracție de acid nucleic, Așteptăm cu nerăbdare să stabilim o relație reciproc avantajoasă cu dvs., bazată pe produsele și soluțiile noastre de înaltă calitate, prețuri rezonabile și cele mai bune servicii.Sperăm ca produsele noastre să vă aducă o experiență plăcută și să purtați un sentiment de frumusețe.
Manuale de instructiuni:Plant Total ARN Isolation Kit Plus Manual de instrucțiuni

respectă contractul”, se conformează cerințelor pieței, se alătură concurenței de pe piață prin calitatea sa bună, de asemenea, oferind un suport mai cuprinzător și mai superb pentru clienți pentru a-i lăsa să devină mare câștigător.Urmărirea companiei, este cu siguranță plăcerea clienților pentru China, cel mai bine vândut kit de extracție virală ADN&Rna, ne-am extins afacerea în Germania, Turcia, Canada, SUA, Indonezia, India, Nigeria, Brazilia și alte regiuni ale lumii.Lucrăm din greu pentru a fi unul dintre cei mai buni furnizori globali.
China Produs nou China Kit de extracție ADN și ADN și extracție de acid nucleic, așteptăm cu nerăbdare să stabilim o relație reciproc avantajoasă cu dvs., bazată pe produsele și soluțiile noastre de înaltă calitate, prețuri rezonabile și cele mai bune servicii.Sperăm ca produsele noastre să vă aducă o experiență plăcută și să purtați un sentiment de frumusețe.

Coloana blocată

După blocarea coloanei, randamentul de ARN este redus sau chiar imposibil de purificat, iar masa de ARN obţinută este scăzută.

Analiza cauzelor comune:

1. Pauzele de probă nu sunt amănunțite.

Ruperea probei nu provoacă blocarea completă a COLONAȚEI DE CURĂȚARE A ADN-ului, afectând în același timp randamentul și calitatea ARN.Vă recomandăm operația de măcinare rapidă într-un azot lichid suficient atunci când ați spart probele. Încercați să zdrobiți peretele celular al probei, membrana celulară și alte țesuturi.Pentru mostrele de plante de polizaharide de poliol, vă recomandăm să utilizați KIT DE IZOLARE ARN Total Plant PLUS.

2. Când se aspira supernatantul de probă separată cu coloana de curățare ADN, posibilul precipitat fragmentat de celule poate fi inhalat.

Sedimentele fragmentate celulare prelevate vor cauza Coloana ARN-ONLY care va fi blocată atunci când se efectuează operația de adsorbție a ARN (vezi pasul 6).Vă recomandăm să vă aspirați cu atenție acest supernatant pentru a evita aspirarea resturilor celulare.

3. Cantitatea inițială a probei este prea mare.

Utilizarea excesivă a probei va avea ca rezultat fragmentarea incompletă a probei sau liza celulară incompletă de către Buffer PSL1, ducând la blocarea coloanei de purificare în timpul purificării.Kit de izolare a ARN total al plantelor Fiecare probă de operare purificată este de 50 mg.Pentru mostrele de plante de polio-polizaharide, vă recomandăm să încercați KIT DE IZOLARE ARN Total Plant PLUS.

4. Temperatura centrifugei este prea scăzută.

Întregul proces de izolare și purificare a ARN-ului se realizează la temperatura camerei (20-25°C), cu excepția faptului că țesutul eșantionului este spart de azot lichid. Temperatura unor centrifuge criogenice este mai mică de 20°C.℃, care poate provoca blocarea coloanei de curățare ADN și/sau a coloanei numai ARN.Dacă se întâmplă acest lucru, setați temperatura centrifugei la 20-25℃, șiasigurați-vă că amestecul de liză și/sau supernatantul adăugat cu etanol a fost preîncălzit la 37°C°C.

Niciun ARN extras sau randamentul de ARN este scăzut

De obicei, există mulți factori care afectează eficiența recuperării, cum ar fi: conținutul de ARN al probei, metoda de operare, volumul de eluție etc.

Analiza cauzelor comune, după cum urmează:

1. În timpul operațiunii a fost efectuată o baie de gheață sau o centrifugare la temperatură joasă (4°C).

Sugestie: Operați la temperatura camerei (15-25°C) în întregul proces, nu faceți baie de gheață și centrifugare la temperatură joasă.

2.ARN-ul a fost degradat din cauza conservării necorespunzătoare a probei sau a conservării pe termen lung a probei.

Recomandare: Probele proaspăt colectate trebuie congelate rapid în azot lichid și apoi depozitate la -80 ° C pentru o perioadă lungă de timp, evitați înghețarea și dezghețarea repetată a probelor;sau imediat înmuiați probele în soluție de stabilizator de ARN RNAlater (probe de animale).

3. Fragmentarea insuficientă a probei și liza duc la blocarea coloanei de purificare.

Sugestie: Când măcinați țesutul, vă rugăm să vă asigurați că țesutul este suficient de măcinat și transferați-l rapid în tamponul pre-preparat PSL1 (confirmați că a fost adăugată proporția corectă de β-ME, vezi pasul 1 al procedurii).

4. Eluentul a fost adăugat incorect.

Sugestie: Asigurați-vă că ddH2O fără RNază este picurat în mijlocul membranei coloanei de purificare.

5. Volumul corect de etanol absolut nu a fost adăugat la tamponul PSL2 sau tamponul PRW2.

Sugestie: Urmați instrucțiunile, adăugați volumul corect de etanol absolut în Buffer PSL2 și Buffer PRW2 și amestecați bine înainte de a utiliza kitul.

6. Cantitatea de probă de țesut este inadecvată.

Sugestie: Utilizați 50 mg de țesut la 500 μl de tampon PSL1.Utilizarea prea multă țesut va reduce cantitatea de ARN extras și puritatea ARN-ului rezultat va fi, de asemenea, redusă.Vă recomandăm insistent ca doza inițială a probei să nu depășească 50 mg per operațiune de extracție a ARN.

7. Volum de eluție inadecvat sau eluție incompletă.

Sugestie: Volumul de eluent al coloanei de purificare este de 50-200 μl;dacă efectul de eluție nu este satisfăcător, se recomandă prelungirea timpului la temperatura camerei după adăugarea ddH2O fără RNază preîncălzită, cum ar fi 5-10 min.

8. Coloana de purificare are reziduuri de etanol după spălarea cu BufferPRW2.

Sugestie: Dacă tubul gol este centrifugat timp de 1 min și mai rămâne etanol după spălare în tampon PRW2, puteți crește timpul de centrifugare a tubului gol la 2 minute sau puneți coloana de purificare la temperatura camerei timp de 5 minute pentru a elimina complet etanolul rezidual.

9.Setul a fost folosit incorect.

Sugestie: pentru mostrele de plante de polizaharide polifenolice, este posibil ca utilizarea truselor obișnuite, cum ar fi Plant Total ARN Isolation Kit, să nu poată obține mostre de ARN ideale.Vă recomandăm să utilizați Plant Total ARN IsolationKit Plus, care este special conceput pentru mostrele de plante de polizaharide polifenolice.Un kit special dezvoltat pentru extragerea ARN-ului din probe de plante de polifenoli și polizaharide.

Valoarea OD260/OD280 este scăzută

Eluarea ARN cu ddH2O și utilizat pentru citirile spectrofotometrului are ca rezultat valori scăzute OD260/OD280.Vă recomandăm să utilizați 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (în loc de ddH2O fără RNază pentru eluarea ARN) pentru a obține valori OD260/OD280 relativ corecte, consultați „Testele de concentrare și purificare a ARN” la pagina 19.

ARN-ul purificat este degradat

Calitatea ARN-ului purificat este legată de factori precum conservarea probei, contaminarea cu RNază și manipularea.

Analiza cauzelor comune:

1. Probele de țesut nu au fost depozitate la timp după colectare.

Recomandare: Dacă probele de țesut nu sunt folosite la timp după colectare, vă rugăm să le păstrați imediat în azot lichid la temperatură scăzută sau să le transferați la -80°C pentru depozitare pe termen lung după congelare rapidă în azot lichid sau să scufundați imediat probele în soluție de stabilizator ARN RNAlater (probe de animale).Pentru extracția ARN, încercați să utilizați mostre de țesut proaspăt colectate.

2. Congelarea și decongelarea repetată a probelor de țesut.

Sugestie: Când depozitați probe de țesut, cel mai bine este să le tăiați în bucăți mici pentru conservare și să scoateți o parte din ele atunci când le utilizați pentru a evita degradarea ARN-ului cauzată de înghețarea și dezghețarea repetată a probelor.

3.RNaza se introduce în sala de operație sau nu se poartă mănuși de unică folosință, măști etc.

Sugestie: Experimentele de extracție a ARN sunt cel mai bine efectuate în operațiuni separate de ARN, iar masa de laborator trebuie curățată înainte de experiment, iar mănuși și măști de unică folosință trebuie purtate în timpul experimentului pentru a evita degradarea ARN cauzată de introducerea RNazei în cea mai mare măsură.

4.Reactivul este contaminat cu RNază în timpul utilizării.

Sugestie: Înlocuiți cu o nouă serie de truse de extracție a ARN total din plante pentru experimente conexe.

5. Tuburile de centrifugă și vârfurile pipetei utilizate pentru manipularea ARN-ului sunt contaminate cu RNază.

Sugestie: Asigurați-vă că tuburile de centrifugă, vârfurile pipetei, pipetele etc. utilizate în extracția ARN sunt toate fără RNază.

Manuale de instructiuni:

Plant Total ARN Isolation Kit Plus Manual de instrucțiuni