Kit de izolare a ARN viral pentru purificarea ARN viral din plasmă, ser și alte probe
Descriere kit:
Cat.Nr.RE-02011/02014
Pentru purificarea ARN-ului viral din plasmă, ser, fluide corporale fără celule, supernatanți de cultură celulară.
Izolați și purificați rapid ARN-ul viral din probe precum plasmă, ser, fluide corporale fără celule și supernatanți de cultură celulară.
-Nu trebuie să vă faceți griji cu privire la degradarea ARN-ului.Întregul kit nu conține RNază
- Simplu - toate operațiunile sunt finalizate la temperatura camerei
-Rapid - operațiunea poate fi finalizată în 20 de minute
-Randament mare de ARN: coloana doar cu ARN și formula unică pot purifica eficient ARN-ul
-Sigur - nu se utilizează reactiv organic
-Capacitate mare de procesare a probelor - probe de până la 200μl pot fi procesate de fiecare dată.
-Calitate înaltă - ARN-ul purificat este extrem de pur, lipsit de proteine și alte impurități și poate îndeplini diverse aplicații experimentale în aval.
Descrieri
Setul folosește coloana de spin și formula dezvoltate de Foregene, care poate extrage eficient ARN viral de înaltă puritate și de înaltă calitate din probe precum plasmă, ser, fluid corporal fără celule și supernatant de cultură celulară.Kitul adaugă în mod specific acrilamidă liniară, care poate capta cu ușurință cantități mici de ARN din probe.Coloana ARN-Only poate lega eficient ARN-ul.Kitul poate procesa un număr mare de mostre în același timp.
Întregul kit nu conține RNază, astfel încât ARN-ul purificat nu va fi degradat.Tamponul viRW1 și Tamponul viRW2 pot asigura că acidul nucleic viral obținut este lipsit de proteine, nuclează sau alte impurități, care pot fi utilizate direct pentru experimentele de biologie moleculară din aval.
Specificații
50 de pregătiri, 200 de pregătiri
Componentele trusei
| Acrilamidă liniară |
| ViRL tampon |
| Tampon viRW1, tampon viRW2 |
| DdH fără RNază2O |
| Coloana numai ARN |
| Instrucțiuni |
Caracteristici și avantaje
-Nu trebuie să vă faceți griji cu privire la degradarea ARN-ului.Întregul kit nu conține RNază
- Simplu - toate operațiunile sunt finalizate la temperatura camerei
-Rapid - operațiunea poate fi finalizată în 20 de minute
-Randament mare de ARN: coloana doar cu ARN și formula unică pot purifica eficient ARN-ul
-Sigur - nu se utilizează reactiv organic
-Capacitate mare de procesare a probelor - probe de până la 200μl pot fi procesate de fiecare dată.
-Calitate înaltă - ARN-ul purificat este extrem de pur, lipsit de proteine și alte impurități și poate îndeplini diverse aplicații experimentale în aval.
Parametrii kitului
Aplicare kit:
Este potrivit pentru extracția și purificarea ARN-ului viral în probe precum plasmă, ser, fluid corporal fără celule și supernatant de cultură celulară.
Fluxul de lucru
Conditii de depozitare
- Setul poate fi păstrat timp de 24 de luni la temperatura camerei (15-25℃) sau 2-8℃ pentru un timp mai îndelungat.
- Soluția de acrilamidă liniară poate fi păstrată la temperatura camerei timp de 7 zile.După ce ați primit kitul, vă rugăm să scoateți soluția de acrilamidă lineară și să o păstrați la -20℃.
-După adăugarea acrilamidă liniară la tampon viRL, aceasta poate fi păstrată la 2-8℃ timp de până la 48 de ore.Vă rugăm să utilizați soluția proaspătă preparată.
Ghiduri pentru analiza problemelor
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Niciun ARN nu poate fi extras sau randamentul de acid nucleic este scăzut
De obicei, există mulți factori care afectează eficiența recuperării, cum ar fi: conținutul de ARN al probei, metoda de operare, volumul de eluție etc..
Analiza cauzelor comune:
1. Baie de gheață sau centrifugare la temperatură joasă (4 ° C) în timpul funcționării.
Sugestie: Funcționare la temperatura camerei (15-25 ° C), niciodată baie cu gheață și centrifugă la temperatură joasă.
2. Depozitarea incorectă a probei sau depozitarea probelor pentru prea mult timp.
Sugestie: Păstrați probele la -80 ° C sau congelați în azot lichid și evitați utilizarea repetată a înghețului-dezghețului;încercați să utilizați probe proaspăt colectate pentru extracția ARN.
3.Liza insuficientă a probei
Recomandare: Vă rugăm să vă asigurați că proba și soluția de lucru (acrilamidă liniară) au fost bine amestecate și incubate timp de 10 minute la temperatura camerei (15-25 ° C)
4. Eluentul a fost adăugat incorect
Recomandare: Asigurați-vă că ddH2O fără RNază este adăugat la mijlocul membranei coloanei de purificare
5. Volum necorespunzător de etanol anhidru în tampon viRW2
Sugestie: Urmați instrucțiunile, adăugați volumul corect de etanol anhidru în Buffer viRW2 și amestecați-le bine înainte de a utiliza kitul.
6.Utilizarea necorespunzătoare a probei.
Sugestie: 200 µl de probă la 500 µl de tampon viRL.Volumul excesiv de probă va duce la o viteză redusă de extracție a ARN.
7.Volum de eluție necorespunzător sau eluție incompletă.
Sugestie: Volumul de eluant al coloanei de purificare este de 30-50μl;dacă efectul de eluție nu este satisfăcător, se recomandă adăugarea ddH fără RNază preîncălzită2O și prelungește timpul de plasare la temperatura camerei, cum ar fi 5-10 min
8. Coloana de purificare are reziduuri de etanol după clătirea în tampon viRW2.
Sugestie: Dacă etanolul rămâne încă după clătirea în tampon viRW2 și centrifugarea cu tub gol timp de 2 minute, coloana de purificare poate fi lăsată la temperatura camerei timp de 5 minute după centrifugarea tubului gol pentru a îndepărta complet etanolul rămas.
Degradarea moleculelor de ARN purificate
Calitatea ARN-ului purificat este legată de factori precum depozitarea probei, contaminarea cu RNază și funcționarea.
Analiza cauzelor comune:
1. Probele colectate nu au fost salvate la timp.
Sugestie: Dacă proba nu este utilizată la timp după colectare, vă rugăm să o păstrați la -80 ℃ sau azot lichid imediat.Pentru extragerea moleculelor de ARN, încercați să utilizați probe proaspăt colectate ori de câte ori este posibil.
2. Probele colectate au fost înghețate și dezghețate în mod repetat.
Sugestie: Evitați înghețarea și decongelarea repetată (nu mai mult de o dată) în timpul colectării și depozitării probei, altfel randamentul de acid nucleic va scădea.
3.RNaza a fost introdusă în sala de operație sau nu s-au purtat mănuși de unică folosință, măști etc.
Sugestie: Experimentul de extracție a moleculelor de ARN se efectuează cel mai bine într-o cameră separată de operație ARN, iar masa experimentală este curățată înainte de experiment.Purtați mănuși și măști de unică folosință în timpul experimentului pentru a evita degradarea ARN cauzată de introducerea RNazei.
4. Reactivul este contaminat cu RNază în timpul utilizării.
Sugestie: Înlocuiți cu noul kit de izolare a ARN viral pentru experimente conexe.
5.Contaminarea cu RNază a tuburilor de centrifugă, vârfurilor pipetei etc. Sugestie: Asigurați-vă că tuburile de centrifugă, vârfurile pipetei și pipetele nu conțin RNază.
Moleculele de ARN purificate au afectat experimentele din aval
Moleculele de ARN purificate de coloana de purificare vor afecta experimentele din aval dacă există prea mulți ioni de sare sau proteine, cum ar fi: transcripție inversă, Northern Blot etc.。
1. Există ioni de sare rămași în moleculele de ARN eluate.
Recomandare: Asigurați-vă că a fost adăugat volumul corect de etanol anhidru în Buffer viRW2 și spălați coloana de purificare de două ori în conformitate cu viteza de centrifugare corectă din instrucțiunile de operare; Dacă mai rămân ioni de sare, puteți adăuga Buffer viRW2 în coloana de purificare și lăsați-l la temperatura camerei timp de 5 minute.Apoi efectuați centrifugarea pentru a elimina în cea mai mare măsură contaminarea cu ioni de sare
2. Există etanol rămas în moleculele de ARN eluate
Sugestie: odată ce ați confirmat că coloanele de purificare au fost clătite cu Buffer viRW2, efectuați centrifugarea cu tub gol conform turației centrifugei din instrucțiunile de operare.Dacă mai rămâne etanol, acesta poate fi lăsat timp de 5 minute la temperatura camerei după o centrifugare cu tub gol pentru a îndepărta etanolul rămas în cea mai mare măsură.
Manuale de instructiuni:
Manual de instrucțiuni kit de izolare a ARN viral
