Kit ForeDirect RT-qPCR
Descriere kit:
◮Pentru amplificarea directă în timp real a ARN din colecții de tampon fără procese de purificare a ARN.Acest kit completează ciclurile qRT-PCR în decurs de o oră.Amestecul de enzime este un amestec optimizat de Reverse Transcriptază, Hot-Start Taq DNA polimerază, inhibitor de RNază.Tamponul de reacție conține toate componentele necesare, inclusiv componentele tampon optimizate, Mg2+, dUTP și dNTP-uri.
Descriere
Kitul ForeDirect RT-qPCR este conceput pentru amplificarea directă a ARN în timp real din colecții de tampon fără procese de purificare a ARN.Acest kit completează ciclurile qRT-PCR în decurs de o oră.Amestecul de enzime este un amestec optimizat de Reverse Transcriptază, Hot-Start Taq DNA polimerază, inhibitor de RNază.Tamponul de reacție conține toate componentele necesare, inclusiv componentele tampon optimizate, Mg2+, dUTP și dNTP-uri.
Specificații
100T
Componentele trusei
| Agent de eliberare a acidului nucleic |
| Protector ARN |
| 2× RT-qPCR tampon |
| Amestec de enzime (Taq&M-MLV) |
| Instrucțiuni |
Aplicație PCR
1. Odată ce tuburile de reacție PCR au fost centrifugate pentru scurt timp, puneți-le în rezervorul de probă al instrumentului de amplificare.
2. Protocol termic
| Etapa | Temperatura | Timp | Cicluri | |
| 1 | Transcriere inversă | 50℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Pre-denaturare | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturarea | 95℃ | 10 secunde | 42 |
| 4 | Recoacere/Extensie | 60℃ | 30 de secunde | |
Notă:Semnalul fluorescent a fost detectat imediat după etapa de extindere a fiecărui ciclu.
3. După setare, salvați fișierul și rulați programul de reacție.
Etape de operare
Înainte de prepararea reactivului, toți reactivii din kit trebuie dezghețați la temperatura camerei și amestecați ușor.
Prepararea reactivului
1. Pregătiți amestecul de eliberare a acidului nucleic
| Componentă | Volumul per probă sau control |
| Agent de eliberare a acidului nucleic | 5μL |
| Protector ARN | 0,5 μL |
2. Pregătiți amestecul de reacție
| Componentă | Volumul per probă sau control |
| 2× RT-qPCR tampon | 15 μL |
| Amestec de enzime (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Amorse și sonde | 1μL |
Depozitare și termen de valabilitate
-Setul trebuie depozitat la -20± 5℃.Perioada de valabilitate este de 12 luni.
-Evitați ciclurile repetate de îngheț-dezgheț (<5 cicluri).
