Kit RT-qPCR direct
Descriere kit:
◮ Kitul Direct RT-qPCR, folosind Foreasy Reverse Transcriptase și Foreasy HS Taq DNA Polymerase dezvoltat de Foregene, cu tampon de reacție unic, face acest kit cu rezistență și compatibilitate puternice și poate testa direct reacția folosind sistemul Foregene Lysis ca șablon.Acest kit se poate aplica pentru kit-ul de detectare a acidului nucleic COVID-19 și dezvoltarea kit-ului de detectare a acidului nucleic al altor bacterii patogene.
Descriere
Kitul Direct RT-qPCR oferă tampon RT-qPCR ambalat separat și o enzimă de înaltă eficiențăamestec (Taq、M-MLV、RI)，făcându-l convenabil pentru crearea de kituri și sisteme back-endajustare, în cadrul unei verificări simple.
Specificații
500T, 50.000T
Componentele trusei
| Conținutul trusei (sistem de reacție de 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Amestec de enzime directe | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2 × tampon direct RT-qPCR | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instruire | 1 | 1 |
Etape de operare
Înainte de prepararea reactivului, toți reactivii din kit trebuie dezghețați la temperatura camerei și amestecați ușor.
A: A pregati of șablon și reactiv
1. Pregătiți șablonul ARN pregătit (Se recomandă utilizarea kit-ului din seria Foregene Total ARN Isolation Kit pentru a extrage și purifica șablonul ARN) sau produsul de cracare a probei (Se recomandă utilizarea sistemului Foregene Lysis), primeri specifici (10 μM) și alte consumabile relevante, instrument.
2. Puneți tamponul direct RT-qPCR 2×, ddH2O fără RNază și 20× colorant de referință ROX (dacă este'este necesar) în cutia cu gheață, făcându-le să se topească în mod natural și amestecate ușor.
B: A pregati of RT-qPCR sistem
Masa 1 : A pregati of RT-qPCR ssistem
| Componentă | Volum | Concentrarea finală |
| 2 × tampon direct RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Amestec de enzime directe | 1μL | |
| Primer direct (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Primer invers (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sondă (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Șablon (ARN sau lizat) | X μL | |
| 20 × Colorant de referință ROX | - | 1* |
| RNază-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volum total | 20μL |
C: A stabilit cel RT-qPCR reacţie program
Masa 2 : RT-qPCR reaction program setare (pentru exemplu: Două-Etapa metodă)
| Etapa | Temperatura | Timp | Cicluri | Conţinut | |
| 1 | 50℃ | 15 minute | 1* | 1 | Transcriere inversă |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Pre-denaturare | |
| 3 | 95℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturarea | |
| 60℃ | 30 sec 2* | Recoacere/Extensie | |||
Depozitare și termen de valabilitate
-Setul trebuie depozitat la -20± 5℃.Perioada de valabilitate este de 12 luni.
-Evitați ciclurile repetate de îngheț-dezgheț (<5 cicluri).
